1．用RPMI-1640培養(yǎng)液洗滌對(duì)數(shù)生長期（培養(yǎng)3天）的CTLL-2細(xì)胞兩次，每次250×g離心10分鐘，洗去培養(yǎng)液中殘存的IL-2。

2．用臺(tái)盼藍(lán)（1％ Trypan blue）染色法計(jì)數(shù)細(xì)胞并決定細(xì)胞的活力，用10％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞至1×105/ml。

3．在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔加0.1ml倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)IL-2或待測(cè)樣品，每個(gè)稀釋度三個(gè)復(fù)孔，標(biāo)準(zhǔn)IL-2從40 IU/ml稀釋到0.019 IU/ml（8～10個(gè)稀釋度），陰性對(duì)照孔不加IL-2。

4．每孔加0.1ml細(xì)胞懸液，在37℃ 5％ CO2的飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時(shí)。每孔加10μl（0.5μCi或1.85×104Bq）[3H]脫氧胸苷，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。

5．用多頭細(xì)胞收集器將細(xì)胞收集到玻璃纖維濾紙上，用3％醋酸水溶液濾紙3次，洗去游離的[3H]TdR。將濾紙置液體閃爍瓶中，加入5ml閃爍液。在液體閃爍儀上計(jì)數(shù)細(xì)胞攝入的同位素活性（每分鐘放射性計(jì)數(shù)，cpm），根據(jù)儀器效率換算成dpm（每分鐘衰變數(shù)）。

6．用dpm值對(duì)樣品稀釋倍數(shù)作圖。在圖上，標(biāo)準(zhǔn)IL-2的曲線與待測(cè)樣品的曲線應(yīng)當(dāng)呈平行的S型，說明是同樣的分子反應(yīng)。比較同樣dpm處的不同稀釋倍數(shù)，決定待測(cè)樣品的相應(yīng)濃度。